液相色譜儀流動相的正確使用和過濾脫氣
點擊: 次 時間:2021-12-09 11:30
一、液相色譜儀流動相的正確使用
1、流動相要臨用現配,貼好標簽,寫明有效期,配置日期等。
2、使用色譜級試劑,盡量使用0.2μm濾膜過濾含鹽流動相,使用0.45μm濾膜過濾有機相,注意溶劑與濾膜的兼容性。
3、進行梯度實驗時要注意梯度變化過程中流動相的互溶性,不能互溶的溶劑不可以直接切換,使用異丙醇作為過渡溶劑切換。
4、使用緩沖鹽的流動相時注意過渡,不要直接使用高有機相沖,避免鹽析,并注意清洗泵柱塞桿。
5、對于等度純鹽相實驗,建議可以將配置好的流動相在冰箱中冷藏,半天后更換放置至室溫的新的流動相。其他等度條件水相與有機相預混后上機,不要用泵比例閥在線混合。
二、液相色譜儀流動相的過濾
所有溶劑使用前都必須經0.45μm(或0.22μm)過濾,以除去雜質微粒。用濾膜過濾時,特別要注意分清有機相(脂溶性)濾膜和水相(水溶性)濾膜。有機相濾膜一般用于過濾有機溶劑,過濾水溶液時流速低或濾不動。水相濾膜只能用于過濾水溶液,嚴禁用于有機溶劑,否則濾膜會被溶解。對于混合流動相,可在混合前分別濾過,如需混合后濾過,選擇適當的濾膜,選擇時可以參考濾膜化學兼容性表。
三、液相色譜儀流動相的脫氣
流動相常用脫氣方法:抽真空、超聲、吹氦等。超聲脫氣操作簡單,成本低,10-20分鐘的超聲處理對許多有機溶劑或有機溶劑/水混合液的脫氣是足夠了(一般500mL溶液需超聲20-30min方可),此法不影響溶劑組成。超聲時應注意避免溶劑瓶與超聲槽底部或壁接觸,以免玻璃瓶破裂,容器內液面不要高出水面太多。離線脫氣法不能維持溶劑的脫氣狀態,在停止脫氣后,氣體立即開始回到溶劑中。在1-4小時內,溶劑又將被環境氣體所飽和。一般說來有機溶劑中的氣體易脫除,而水溶液中的氣體較頑固。在溶液中吹氦是相當有效的脫氣方法,這種連續脫氣法在電化學檢測時經常使用。但氦氣昂貴,難于普及。
(內容參考儀器信息網)
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